第一节 核酸分离与纯化的设计与原则细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子，均与蛋白质结合成核蛋白（nucleoprotein）。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白（deoxyribonucleoprotein，DNP），RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP）。其中真核生物的DNA又有染色体DNA与细胞器DNA之分。前者位于细胞核内，约占95%，为双链线性分子；后者存在于线粒体或叶绿体等细胞器内，约占5%，为双链环状分子。除此之外，在原核生物中还有双链环状的质粒DNA；在非细胞型的病毒颗粒内，DNA的存在形式多种多样，有双链环状、单链环状、双链线状和单链线状之分。DNA分子的总长度在不同生物间差异很大，一般随生物的进化程度而增长。如人的DNA大约由3.0×109个碱基对（base pair, bp）组......

　　稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备,

　　电子产品高性能、小型化、轻型化的需求，使低频电缆组装件朝着集成化、小型化、标准化、高可靠、长寿命的方向发展。特别是在航空、航天、兵器、舰艇等军用武器装备中，要求设备具有更好的环境适应性，能在强振动冲击、高低温交变、盐雾腐蚀等环境下使用。因此，对装备用低频电缆组装件的性能要求也不断提高，要求其

　　1、保证核酸一级结构的完整性2、排除其它分子的污染（如提取DNA时排除RNA的干扰）3、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子4、尽可能降低蛋白质、多糖和脂类等大分子物质

　　引物设计的必要条件是与引物互补的靶DNA序列必须是已知的，两引物之间的序列未必清楚，这两段已知序列一般为15～20个碱基，可以用DNA合成仪合成与其对应互补的两条引物。除此之外，引物设计一般遵循的原则包括： 一、引物长度根据统计学计算，长约17个碱基的寡核苷酸序列在人的基因组中可能出现的几率为1

　　一．生物实验室项目的设计理念与原则 1. 最大限度地尊重所在地的生态环境，表达对环境的尊重 ： 生态理念的实验室设计在对将要实施的实验室项目充分分析基础上,对方案构思中将主体建筑作为整体环境的背景的设计理念，将实验室所在建筑包容于环境之中。要充分的考虑到生物实验室周围的生态设施，树木草丛同样也可以起

　　核酸分离纯化实验技术指南：      总RNA提取常见问题分析      RNA降解      1. 新鲜细胞：如果试剂没有问题，且外源性污染也可以排除，那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如  果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞，一定要使裂解液能覆盖住细胞。       2. 新鲜组织：某些富含

　　蛋白核酸分离纯化仪适用于分离和提纯蛋白质、酶、多肽、激素、多糖、核酸类等物质。分子大小彼此相差25%的样品，只要通过单一凝胶床就可以完全将它们分开。利用凝胶的分子筛特性，可对这些物质的溶液进行脱盐、浓缩、去热源和脱色。它是生物分子纯化的理想选择。它具有功能多、使用简便、经济等特点。小巧的设计限度地

　　核酸包括DNA、RNA两种分子 ，在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体 DNA为双链线性分子 ，原核生物的“染色体 ”、质粒 及真核细胞器 DNA为双链环状分子；有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子，RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子，不同类型的RNA分子可以具有不同的结

　　1、引入的试剂一般只跟杂质反应；2、后续的试剂应除去过量的前加的试剂；3、不能引进新物质；4、杂质与试剂反应生成的物质易与被提纯物质分离；5、过程简单，现象明显，纯度要高；6、尽可能将杂质转化为所需物质；7、除去多种杂质时要考虑加入试剂的合理顺序；8、如遇到极易溶于水

　　变压器截面积的确定 铁芯截面积A是根据变压器总功率P确定的。设计时，若按负载基本恒定不变，铁芯截面积相应可取通常计算的理论值即A=1.25。 每伏匝数的确定 变压器的匝数主要是根据铁芯截面积和硅钢片的质量而定的。 漆包线的线径确定 线径应根据负载电流确定，由于漆包

　　酶的分离纯化一般包括三个基本步骤：即抽提、纯化、结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液，此时不可避免地夹带着一些杂质，然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来，或者从此溶液中选择性地除去杂质，然后制成纯化的酶制剂。酶分离纯化的最终目的是获得单一纯净的酶，因此，容许在不破坏“目的酶”的限度内，使用各种

　　大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在，需要不同的纯化策略。现在，许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能，这些自然需要将蛋白质分离出来后，进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认，蛋白质纯化比起DNA 克隆和操作来是更具有艺术性的，尽管DNA 序列具有异乎

　　实验概要1．掌握蛋白质的分离技术2．掌握分段盐析、凝胶层析及蛋白质醋酸纤维薄膜电泳的原理及操作方法3．掌握电泳方法检测分离效果实验原理          不同的蛋白质的分子量、溶解度、以及在一定条件下带电的情况有所不同，可以更据这些性质的差别，分离及提纯各种蛋白质。利用硫酸铵分段盐析法将血清中的清蛋

　　实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。    实时荧光定量PCR是实验室最常用的实验。研究基因在mRNA表达水平,以及验证基因敲除后下游靶基因变化情况等等。对于新

　　一、血型与红细胞凝集若将血型不相容的两个人的血滴放在玻片上混合，其中的红细胞即聚集成簇，这种相容称为凝集（agglutination）。红细胞的凝集有时还伴有溶血。当血型（bolld group）不相容的血液输入循环血液中时，在血管内可发生同样的情况，此凝集成簇的红细胞可以堵塞毛细血管，

　　核酸的纯化主要方法：超离心（提纯和分离最常用的方法，又分为①沉降速度超离心②沉降平衡超离心ρ=1.660+（G+C）%，相似条件下核酸密度ssRNA>

　　dsRNA>

　　ssDNA>

　　dsDNA>

　　tRNA和蛋白质环状DNA>

　　线状DNA,DNA分子密度与构想有关，加入重金属AgHg）核酸提取的一般步骤：1、破碎

　　PCB有单面、双面和多层的，对于收音机等简单的电器来说，使用单面PCB即可。但是，随着时代的进步，无论是功能还是体积，电子产品都需要更新换代。对于多功能、小体积的电子产品，单面和双面PCB都不能完全满足要求，而必须使用多层PCB。多层PCB有诸多优点，比如：装配密度高，体积小；电子元器件之间

　　微生物实验室是所有实验室中最特别的，设计建设存在在一定的原则和要求。以食品微生物检测实验室为例，解析微生物实验室的设计原则和要求。 食品微生物实验室就是采用检测手段，确定单位样品中某种或某类微生物的数量或存在状况的实验室。 核心实验室配置 ◆生物安全实验室 常被称之为：致病菌室、阳性

　　实验概要本实验介绍了土壤微生物分离与纯化的实验原理和方法。了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。实验原理测定微生物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如有杂菌或杂质，常不易分辨。菌体较大的酵母菌或

　　二、导线／电缆线的选用由于装备使用要求和环境各不相同，对电线电缆的性能指标要求也不同，包括耐高低温、电磁兼容性、耐疲劳、柔软耐弯曲、抗拉压、抗振动、扭转、耐溶剂、抗辐照、阻燃、耐火等各种性能指标要求。目前在机载、车载、地面等装备用低频电缆组装件中使用较多的是耐高温多芯电缆，主要有AF200、

　　2．分支电缆处理工艺分支型装备用低频电缆组装件分支点的处理，对整个电缆的外观、质量可靠性都有较大影响。特别是防波套和屏蔽层的搭接处理工艺，会直接影响产品的电磁兼容性。分支电缆屏蔽层搭接工艺步骤及要求如下：① 将电缆组装件的主干和分支线束上的防波套端头修剪整齐，并将防波套向后退或倒翻在线

　　摘要：蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质，综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异，利用一种同时多种性质差异，在兼顾收率和纯度的情况下，选择蛋白质提纯的方法。关键词：蛋白质 分离纯化前言    蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂

　　摘要：蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质，综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异，利用一种同时多种性质差异，在兼顾收率和纯度的情况下，选择蛋白质提纯的方法。关键词：蛋白质 分离纯化前言    蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂

　　第一部分多糖的提取、纯化目的要求了解多糖提取和纯化的一般方法。实验原理多糖类物质是除蛋白质和核酸之外的又一类重要的生物大分子。早在60年代，人们就发现多糖复杂的生物活性和功能。它可以调节免疫功能，促进蛋白质和核酸的生物合成，调节细胞的生长，提高生物体的免疫力，具有抗肿瘤、抗疡和抗爱滋病 (AIDS)

　　二、粗多糖的纯化粗多糖溶液加入Sevag试剂(氯仿：正丁醇＝3：1混合摇匀)后，置恒温振荡器中震荡过夜，使蛋白质充分沉淀，离心(3000r／min)分离，去除蛋白质。然后浓缩，透析，加入4倍体积的乙醇沉淀多糖，将沉淀冻干。取样品0.1g溶于10ml 0.01mol/L Tris-HCL, PH=7.

　　滤波，屏蔽，接地；众所周知是我们EMC设计的三大手法；其中接地设计是电子产品设计的一个重要问题！接地的目的如下：A．接地可使我们的电路系统中的所有单元电路都有一个公共的参考0电位，也就是各个电路之间没有电位差，保证电路系统能稳定的工作；B．防止外部的电磁干扰。比如机壳接地；为瞬态干扰（ESD）提供了

　　1无菌下游工艺问题发酵产品的下游工艺通常要求所用的设备能满足特殊的需要,尤其是在浓缩和洗涤病原微生物或对感染敏感的微生物的过程中,要求所使用的工艺是密闭的和绝对安全的。一方面,工艺必须确保产品不被外部的细菌感染;另一方面,工艺必须保证病原微生物不致释放出来。食品工业所需细菌、放线菌培养物的大规模生

　　清洁、消毒、灭菌是预防和控制医院感染的一个重要环节.它包括医院病室内外环境的清洁、消毒、诊疗用具、天顺注册=登录首页？器械、药物的消毒、灭菌,以及接触传染病患者的消毒隔离和终末消毒等措施.  一、概念(一)消毒     是指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物,使之达到无害化的处理.根据有无已知的传染源可分预防性消毒和疫源